Calendrier scientifique – Février 2025

L’hémoglobinurie paroxystique nocturne

L’hémoglobinurie paroxystique nocturne (HPN) est une maladie clonale des cellules souches hématopoïétiques rare et potentiellement mortelle caractérisée par une hémolyse intravasculaire chronique causée par la cascade du complément, des thromboses et une cytopénie en lien avec une insuffisance médullaire. Elle résulte d’une mutation par expansion d’un clone qui inactive le gène PIG-A, situé sur le chromosome X, entraînant une déficience de protéines à ancrage glycosylphosphatidylinositol (GPI) à la surface des globules rouges (GR), des monocytes et des granulocytes. Parmi elles se trouvent deux protéines régulatrices du complément à la surface des globules rouges : la protéine CD55 (facteur accélérant le déclin ou DAF) et la protéine CD59 (inhibiteur membranaire de la lyse réactive ou MIRL). Une déficience de ces deux protéines conduit ainsi à la destruction des globules rouges in vivo [1].

Diagnostic

Le diagnostic de l’HPN nécessite un grand nombre d’analyses de laboratoire :

1. Une cytométrie en flux des antigènes à ancrage GPI, mettant en évidence des populations de GR et de GB négatives ;
2. Un test de Coombs positif ;
3. Une anémie avec une numération de réticulocytes plus importante ;
4. Des taux plus importants de lactate déshydrogénase et de bilirubine ;
5. Un taux d’haptoglobine diminué ;
6. La présence d’hémoglobine libre dans le sérum et une hémoglobinurie ;
7. Des lésions organiques associées, dues à l’hémolyse et/ou à la thrombose [1].

Immunophénotypage par cytométrie en flux, à l’aide du kit d’analyse haute sensibilité HPN DryFlowEx

La cytométrie en flux est considérée comme la méthode de référence pour la détection de clones HPN. Elle occupe donc une place importante dans le diagnostic, le suivi et la prise en charge clinique des patients atteints d’HPN. La version la plus récente des directives consensuelles de l’ICCS/ESCCA [résumées au point 2] garantit la sensibilité et la précision de détection de clones HPN même mineurs.

Le kit d’analyse haute sensibilité HPN DryFlowEx a justement été conçu à partir de cette version la plus récente des directives consensuelles de l’ICCS/ESCCA. Il assure un haut niveau de sensibilité de détection, en partie grâce à l’inclusion de la FLAER (proaérolysine marquée à la fluorescéine Alexa Fluor™ 488). La FLAER se lie aux ancres GPI, permettant ainsi de mesurer la présence ou l’absence de ces ancres, indépendamment d’un marqueur de CD spécifique, sur les monocytes et les granulocytes neutrophiles.

Ce kit inclut deux tubes par patient :

1. un tube GR, contenant CD71, CD59 et CD235a ;
2. un tube GB, contenant de la proaérolysine, CD157, CD45, CD64, CD24, CD14 et CD15.

Le mélange présent dans chacun de ces tubes est constitué de réactifs secs ; en d’autres termes, les anticorps sont séchés sur la surface du tube. Cela permet une durée de conservation plus longue, ainsi qu’une fourniture et un stockage à température ambiante. Pour de plus amples détails sur la préparation, le contrôle et l’interprétation, reportez-vous au mode d’emploi.

À partir de ces informations, l’hématologue a été en mesure de déterminer que la patiente présentait à la fois des formes homozygotes (type III) et hétérozygotes (type II) d’HPN, et lui a prescrit de l’éculizumab, une immunothérapie qui lie la protéine C5 du complément et empêche l’activation du système de complément [3]. Cette liaison prévient la destruction des globules rouges dans la circulation sanguine.

Au cours des six derniers mois, le taux d’hémoglobine et la numération des globules rouges de la patiente se sont stabilisés dans l’intervalle des valeurs normales et aucun autre épisode hémolytique n’est survenu.