Fluorocytométrie en flux : un pas en avant pour l'analyse urinaire
Analyse rapide et sensible des sédiments urinaires : s'appuie sur des milliers de particules comptées et classées à partir de l'urine native. L'analyse de l'urine native sans centrifugation ni prétraitement permet d'éviter les sources d'erreur courantes et rend l'analyse encore plus standardisée.
Marquage fluorescent :
La coloration par fluorescence est la première étape du processus de mesure. Des fluorochromes spécifiques sont utilisés pour marquer les structures centrales (ADN) et superficielles (membrane) des particules d'un échantillon. Les fluorochromes sont choisis en fonction de leur capacité à émettre une lumière fluorescente lorsqu'ils sont excités par une longueur d'onde spécifique. Les caractéristiques de chaque particule peuvent ainsi être identifiées et mesurées, ce qui permet de déterminer un plus grand nombre de paramètres cliniques.
Focalisation hydrodynamique :
La focalisation hydrodynamique est la deuxième étape. Au cours de cette étape, un flux de réactifs en gaine est utilisé pour séparer et aligner les particules de l'échantillon. Le flux de réactifs de la gaine entoure l'échantillon d'un flux de fluide qui dirige les particules en une seule file à travers le faisceau laser. Cela garantit que chaque particule est mesurée individuellement et avec précision, ce qui permet d'obtenir des résultats plus précis.
Particle characterisation by laser scanning
La caractérisation des particules par balayage laser est la troisième étape. Au cours de cette étape, chaque particule passe à travers le faisceau laser de 488 nm, qui excite les particules individuelles et peut séparer les cellules à l'aide de quatre signaux différents. Les signaux recueillis par les détecteurs fournissent des informations sur la taille, la forme, la dépolarisation et l'intensité de fluorescence de chaque particule.
Empreintes uniques :
Les signaux lumineux détectés sont traduits en "empreintes digitales" individuelles, qui permettent d'identifier chaque particule et de lui attribuer le paramètre correspondant. Cela permet de quantifier chaque paramètre et d'obtenir des informations détaillées sur les particules présentes dans l'échantillon.
Scattergramme :
Enfin, les signaux recueillis lors d'une mesure sont attribués aux paramètres correspondants et résumés dans des diagrammes de dispersion. Chaque diffusogramme représente les signaux d'un échantillon pour un ou plusieurs paramètres, fournissant une analyse complète des particules et de leurs caractéristiques. La cytométrie en flux fluorescent permet d'analyser un grand nombre de cellules en peu de temps, ce qui fournit des informations détaillées sur les populations cellulaires et leurs caractéristiques. Ces informations peuvent ensuite être utilisées pour soutenir la prise de décision clinique.
