Urotheelcarcinoom, ook wel overgangscelcarcinoom (TCC) genoemd, is de meest voorkomende vorm van blaaskanker. Het begint in de urotheelcellen die de binnenkant van de blaas bekleden, de eerste diagnose valt vaak samen met de aanwezigheid van verwante symptomen in latere stadia van de tumorgroei. Dit heeft een negatieve invloed op de kans op genezing en vereist invasieve procedures, zoals een gedeeltelijke of volledige resectie van de blaas. Aangezien urotheliale carcinomen een hoog remissiepercentage vertonen, moeten behandelde patiënten nauwlettend worden gevolgd door jaarlijks tot vier invasieve cystoscopieën uit te voeren.

De detectie van atypische cellen in de urine met behulp van de research parameter Atyp.C biedt het potentieel om kwaadaardige cellen in een vroeg stadium op te sporen en onnodige invasieve cystoscopieën te verminderen.

Atypische cellen in de urine

Atypische cellen met veranderingen of cellen die verdacht worden van maligniteit komen door exfoliatie vrij uit het urotheelweefsel en vertonen een of ander morfologisch kenmerk, dat kan zijn:

Vergrote kern > 25 µm
Verhoogde N:C (nucleocytoplasmatisch) verhouding > 80 %
Onregelmatige vorm
Hyperchromasie
Onregelmatige chromatinepatronen
Nucleolische hypertrofie > 5 µm
Verhoogd aantal nucleoli
Onregelmatige kernvorm
Verschijning van cellulaire massa’s

Hoe kan men atypische cellen in urine opsporen?

Urinaire flowcytometrie gebruikt specifieke fluorochromen voor de kleuring van de oppervlaktestructuren en het nucleïnezuurgehalte van cellulaire urinedeeltjes. De gekleurde cellen worden na hydrodynamische focussering in een flowcel geïnjecteerd om de detectie van individuele cellen mogelijk te maken en een hoge nauwkeurigheid te garanderen.

Bij het verzamelen van laserscans op aantal cellen, interne celstructuren, cellulair volume en nucleaire kenmerken ontstaan deeltjesafhankelijke emissiesignalen, die vervolgens worden ingedeeld in een driedimensionaal scattergram. Via speciale algoritmen worden gedetecteerde cellen geïdentificeerd en gekwantificeerd.

Met de research parameter Atyp.C kunnen atypische cellen in de urine worden opgespoord als indicator van een urotheliale maligniteit. Celkenmerken zoals grootte, vergrote kernen en verhoogde nucleocytoplasmische verhoudingen worden beschouwd als een onderscheid tussen atypische cellen en niet-atypische cellen met kernen, zoals WBC en overgangsepitheelcellen.

Atyp.C is een research parameter van de UF-Series en maakt het mogelijk atypische cellen in de urine op te sporen en te onderscheiden van niet-atypische cellen door middel van urinaire flowcytometrie in samenhang met een verhoogd nucleïnezuurgehalte.

Werkwijze van de parameter Atyp.C op de UF-Series

Blaaskankerdiagnostiek in research

Aydin et al. toonden het potentieel van de UF-Series aan bij de detectie van urotheliale maligniteiten in een geval van terugkerend hooggradig urotheelcarcinoom in een ambulante setting. Het gebruik van de UD-10 geautomatiseerde microscoop ondersteunde deze bevindingen.

Tınay et al. toonden het potentieel aan om invasieve cystoscopieën aan patiëntenzijde te vermijden en kosten te besparen voor onnodige behandelingen in een heterogene onderzoekspopulatie. Met een aanvaardbare gevoeligheid van 75% en een specificiteit van 100% toonde de UF-5000 potentiële waarde aan voor diagnostische beslissingen voor patiënten met laag-risico niet-spierinvasieve blaaskanker (NMIBC). Voor patiënten met hoog-risico NMIBC zijn de gevoeligheids- en specificiteitswaarden lager, maar vergelijkbaar of zelfs beter, in vergelijking met cytologie.

Ren et al. toonden de voorspellende kracht van Atyp.C aan voor patiënten met een vermoedelijke diagnose urotheliaal carcinoom. De Atyp.C-bevindingen kwamen in 73 % van de onderzochte gevallen overeen met de cytopathologie. De conclusie is dat Atyp.C kan worden gebruikt als aanvullende test voor urotheliale carcinomen in het kader van de routinediagnostiek, om hoogrisicopatiënten te identificeren voor een meer specifieke follow-up en medische behandeling.

Casus 1

Atyp.C bij het opsporen van blaaskanker

Een 71-jarige mannelijke patiënt meldt zich in de kliniek met uiteenlopende symptomen, waaronder vermoeidheid, koorts, buikpijn en macrohematurie. Er werden verschillende tests aangevraagd, waaronder de analyse van een vers urinemonster.

De resultaten van het routine-urineonderzoek op de UF-5000 bevestigden een macrohaematurie met een RBC-telling van 3.989 cellen/µL. De RBC-info "Dysmorphic RBC?" wijst op een niet-glomerulaire oorsprong voor de hematurie. Bovendien wijst de aanwezigheid van 1.649 bacteriële cellen/µL op een bacteriële urineweginfectie, die gepaard gaat met lichte leucocyturie, zoals blijkt uit het WBC-getal van 289 cellen/µL. De UF-5000 detecteerde ook atypische cellen via de research parameter Atyp.C met een concentratie van 3,8 cellen/µL. Alle bevindingen werden bevestigd door het geautomatiseerde digitale microscoop UD-10.

Fig. 1.1: Numerieke urineonderzoeksresultaten van de UF-5000 voor een patiënt met een indicatie voor ernstige hematurie, lichte leukocyturie, een bacteriële urineweginfectie en een urotheelcarcinoom.

Fig. 1.2: Scattergram afbeelding, met de aanwezigheid van een hoog aantal isomorfe RBC's, wat wijst op een ernstige hematurie van niet-glomerulaire oorsprong.

Fig. 1.3: Scattergrammabeeld, met de aanwezigheid van WBC en atypische cellen in lage concentraties, wat wijst op een milde leucocyturie en een vermoeden van een uriotheliale maligniteit.

Fig. 1.4: Scattergram afbeelding, met nadruk op de aanwezigheid van bacteriecellen, wat wijst op een bacteriurie met een vermoedelijke deelname van Gram-negatieve bacteriën.

Casus 2

Atyp.C bij controle op blaaskanker

Een 75-jarige mannelijke patiënt meldt zich bij zijn huisarts voor een routinecontrole. Hij heeft een medische voorgeschiedenis van diabetes type 2 en is drie jaar geleden behandeld voor niet-spierinvasieve blaaskanker. De tumor werd toen verwijderd door middel van een transurethrale resectie. Herhaaldelijke controles op blaaskanker door middel van cystoscopie, voor het laatst negen maanden geleden uitgevoerd, brachten geen terugkeer van de blaastumor aan het licht.

Een standaard urineonderzoek via urinaire flowcytometrie op de UF-5000 toonde lichte aanwijzingen voor hematurie van niet-glomerulaire oorsprong en leucocyturie door de aanwezigheid van respectievelijk 107 RBC/µL en 221 WBC/µL. Er waren geen aanwijzingen voor een bacteriële infectie van de urinewegen. Wel waren er atypische cellen, die werden gedetecteerd met de research parameter Atyp.C, aanwezig in een concentratie van 5,2 cellen/µL.

Op basis van de diagnostische bevindingen en de eerdere aanwezigheid van urotheliaal carcinoom werd een cystoscopie verricht, waarbij het recidief van een blaastumor werd bevestigd door de aanwezigheid van papillaire structuren.

Fig. 2.1: Numerieke urineonderzoeksresultaten van de UF-5000 voor een patiënt met een voorgeschiedenis van urotheliaal carcinoom, die wijzen op milde hematurie, milde leukocyturie en een urotheliaal carcinoom.

Fig. 2.2: Scattergram afbeelding, met nadruk op de aanwezigheid van isomorfe RBC, wat wijst op een milde hematurie van niet-glomerulaire oorsprong.

Fig. 2.3: Scattergrambeeld, met de aanwezigheid van WBC en atypische cellen in lage concentraties, wat wijst op een milde leucocyturie en een vermoeden van een uriotheliale maligniteit.

Wetenschappelijke referenties

[1] Aydin, O. (2021): Atypical cells parameter in Sysmex UN automated urine analyzer: feedback from the field. Diagn Pathol

[2] Ren, C., Wang, X., Yang, C. et al. (2020): Investigation of Atyp.C using UF-5000 flow cytometer in patients with a suspected diagnosis of urothelial carcinoma: a single-center study. Diagn Pathol

[3] Sanli, O., Dobruch, J., Knowles, M. et al. (2017): Bladder cancer. Nat Rev Dis Primers

[4] Tınay İ , Şahin B, Saraçoğlu S et al. (2019): “Atypical Cell’’ Parameter in Automated Urine Analysis for the Diagnosis of Bladder Cancer: A Retrospective Pilot Study. Bull Urooncol